2025年3月15日,我系朱杨研究员团队在国际期刊《Plant Communications》上发表题为“The intronic structure variation of rapeseed BnaC3.LEAFY regulates the timing of inflorescence formation and flowering”的研究论文,该文通过多组学解析了甘蓝型油菜BnaC3.LEAFY单倍型1早花的遗传机制,为甘蓝型油菜短生育期育种提供了基因资源和理论依据。
利用油菜300份核心种质资源的重测序数据鉴定其中结构性变异(Structural variation,SV)(Wu et al,. 2019, Molecular Plant)。在1月(13周苗龄左右)的大田统计花序形成的早晚,进行基于结构性变异的全基因组关联分析,定位到7个与花序形成时间相关的遗传位点以及11个相关的候选基因,包括一个位于植物特异性先锋转录因子BnaC3.LEAFY第二个内含子上的LINE型逆转座子。BnaC3.LEAFY的两种单倍型中,单倍型1茎尖BnaC3.LEAFY的表达水平更高,花序建立时间与开花时间均更早,这提示BnaC3.LEAFY第二个内含子具有自身表达的能力。
利用CRISPR/Cas9技术,在单倍型2背景下编辑删除BnaC3.LEAFY第二个内含子(保持CDS区域完整),突变体表达水平下降,花序建立时间与开花时间均推迟,该表型与单倍型1完全相反,证明油菜BnaC3.LEAFY第二个内含子的调控功能。同样,在拟南芥中编辑同源基因AtLFY的启动子保守调控区与第二个内含子,突变体表达水平、表型与GUS染色均证明第二个内含子区域具备调控LFY表达的重要功能,其调控能力甚至超过了启动子上保守的调控区域。
LINE型逆转座子上有32个转录因子特异性结合motif,其中包括一个与分生组织特异性表达相关的CAT-box,这些motif可能与单倍型1高表达相关。为了挖掘其下游靶标基因,联合大田单倍型转录组、突变体转录组及BnaC3.LFY蛋白DAP-seq数据,多组学解析了BnaC3.LFY直接调控的下游靶标基因,为培育短生育期油菜提供了理论支持。
文章最后分析发现早花单倍型1具有显著差异的地理分布,在BnIR网站(Yang et al., 2023, Molecular Plant)上两千余份种质资源中,BnaC3.LFY早花单倍型1约占21.7%(478/2205),主要分布于中国半冬性品种中;调查发现中国省份间单倍型分布同样存在显著差异,贵州早熟的高世代育种材料和品种中存在比例较高(22/43),在浙江的材料中较少(2/36)。2023年登记的浙大嘉油23品种(GPD油菜(2024)330370)即为BnaC3.LFY早花单倍型1。
本论文的第一作者为博士研究生宫梦洁同学,通讯作者为朱杨百人研究员。本研究得到科技创新2030(2022ZD0400901)、国家自然科学基金(32100274和32370353)以及中国科协和中国作物学会青年人才托举工程(2020QNRC001)的资助。
原文链接:
https://www.cell.com/plant-communications/fulltext/S2590-3462(25)00080-X
参考文献:
Wu D, Liang Z, Yan T, et al. Whole-genome resequencing of a worldwide collection of rapeseed accessions reveals the genetic basis of ecotype divergence[J]. Molecular plant, 2019, 12(1): 30-43.
Yang Z, Wang S, Wei L, et al. BnIR: A multi-omics database with various tools for Brassica napus research and breeding[J]. Molecular Plant, 2023, 16(4): 775-789.