2016年3月至2018年3月,农学院苗慧莹博士应邀在美国加州大学戴维斯分校Liu Bo实验室学习交流。在此期间,苗慧莹与Liu教授课题组合作创建了基于细胞骨架定位的检测蛋白质互作的方法(Cytoskeleton-Based Localization Assay Reports Protein-Protein Interaction,CAPPI),并探究了γ-Tubulin复合体蛋白GCP6在植物细胞微管形成中的功能,为后续将细胞生物学技术应用于农学研究奠定了基础。
使用CAPPI检测核定位的BIN2和BES1之间的特异性相互作用。Bar=20mm。
(a-c)当仅与GFP或RFP融合表达时,BIN2,BES1和BUB3.1(阴性对照)全部定位于细胞核。 (d-f)当BIN2-GFP和BES1-RFP共表达时,两种融合蛋白都在细胞核中。 (g-i)当BIN2与Lifeact和GFP融合时,Lifeact-BIN2-GFP融合蛋白将BES1-RFP招募到F-actin上。 (j-1)当BIN2与微管结合结构域(MBD)和GFP融合时,MBD-BIN2-GFP融合蛋白将BES1-RFP招募至皮质微管。 (m-o)Lifeact-BIN2-GFP融合蛋白定位于F-actin,但无相互作用的BUB3.1仍留在细胞核中。